環(huán)己基氨基磺酸鈉俗稱(chēng)“甜蜜素”，有些企業(yè)為調節口感而違規添加甜蜜素或添加含有甜蜜素的復合調酒劑，給消費者的健康帶來(lái)了極大的隱患。
山東譜析儀器色譜技術(shù)人員針對國標方法，對樣品前處理方法進(jìn)行改進(jìn)，以消除相應的影響因素并對氣相色譜儀分析條件進(jìn)行優(yōu)化，降低方法的檢出限。與液相色譜–質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行了比對試驗，證明該方法測定結果可靠，操作簡(jiǎn)便，易于推廣。
1. 分析部分
1.1 主要儀器與試劑
國產(chǎn)氣相色譜儀：譜析GC-17型，配有FID檢測器，10μL微量進(jìn)樣器；電子分析天平：FA2004B型；
白酒樣品：實(shí)驗室抽檢樣品；甜蜜素（環(huán)己基氨基磺酸鈉）標準品：純度不低于98%；
環(huán)己基氨基磺酸鈉標準溶液：1mg／mL，精確稱(chēng)取0.1000g環(huán)己基氨基磺酸鈉標準品，加入水溶解并定容至100mL，搖勻；正己烷、氯化鈉：分析純；硫酸溶液：100g／L，分析純；亞硝酸鈉溶液：50g／L，分析純；所用試劑除特殊說(shuō)明外均為分析純；實(shí)驗用水為去離子水。 
1.2 儀器工作條件
毛細管色譜柱：HP–INNOWAX柱（30m×0.32mm×0.25μm）；進(jìn)樣口溫度：180℃；檢測器溫度：220℃；程序升溫：初始溫度50℃，保持7min，以50℃／min升至200℃，保持1min；載氣：氮氣；流速：2.0mL／min；氫氣流量：mL／min；空氣流量：300mL／min；尾吹氣流量：25mL／min；進(jìn)樣量：1μL；分流比：5∶1；保留時(shí)間定性，峰面積定量。
1.3 實(shí)驗方法
1.3.1 標準溶液處理和測定
分別準確吸取0.00，0.10，0.20，0.40，0.80，1.00，2.00mL環(huán)己基氨基磺酸鈉標準溶液于7個(gè)25mL具塞比色管中，加水至10mL置冰浴中，加入2.5mL50g／L亞硝酸鈉及2.5mL100g／L硫酸溶液，搖勻，在冰浴中放置30min，并經(jīng)常搖動(dòng)，然后準確加入5mL正己烷、2.5g氯化鈉，振搖100次，分層后取正己烷層進(jìn)樣1μL進(jìn)行色譜分析。對應各點(diǎn)的濃度分別為0.00，0.02，0.04，0.08，0.16，0.20，0.40g/L,根據分析結果繪制標準曲線(xiàn)。
1.3.2 樣品處理和測定
稱(chēng)取100.0g白酒試樣于250mL燒杯中，用40g／L氫氧化鈉溶液調至堿性，置于水浴鍋上，將白酒樣品揮發(fā)至干，用10mL蒸餾水分3次將殘留物轉移至25mL帶塞比色管中，搖勻，置于冰浴中。其余過(guò)程同標準溶液處理方法。
1.4 色譜圖
在選定的色譜條件下環(huán)己基氨基磺酸鈉標準液的色譜圖。
2. 結果與討論
2.1 樣品處理可行性分析
甜蜜素（環(huán)己基氨基磺酸鈉）對光、熱穩定，因此水浴加熱不會(huì )對其造成影響。白酒中可能存在對甜蜜素測定造成影響的醇酯類(lèi)物質(zhì)如環(huán)己醇等，在蒸干過(guò)程中將揮發(fā)掉，不會(huì )對測定結果造成影響。
2.2 色譜峰校準方法
衍生處理后在毛細管柱上會(huì )出現兩個(gè)峰，前面的峰較大是環(huán)己醇亞硝酸酯峰，后面的峰較小，是環(huán)己醇峰，但隨著(zhù)時(shí)間推移，前面的峰逐漸變小，后面的峰逐漸變大，若用一個(gè)峰校準則結果誤差較大。通過(guò)對兩個(gè)峰面積的變化趨勢進(jìn)行分析發(fā)現，單個(gè)峰的面積是不斷變化的，而兩個(gè)峰面積之和基本處于平衡，因此選擇兩個(gè)峰面積之和進(jìn)行定量，結果更
加準確可靠。儀器工作站中有峰面積加和定量的功能，計算方便快捷。
2.3 工作曲線(xiàn)
對1.3.1中的系列環(huán)己基氨基磺酸鈉標準溶液進(jìn)行測定，以環(huán)己基氨基磺酸鈉濃度X(g／L)為橫坐標，以色譜峰面積Y為縱坐標進(jìn)行線(xiàn)性回歸。結果顯示，在0.02～0.40g／L濃度范圍內有良好的線(xiàn)性關(guān)系，線(xiàn)性方程為Y=1565.32X–2.27，線(xiàn)性相關(guān)系數r=0.9998。
2.4 方法檢出限
在國標方法的基礎上，通過(guò)以下措施降低方法的檢出限：(1)用毛細管色譜柱代替填充柱，穩定性和靈敏度都明顯提高；(2)在樣品處理過(guò)程中，采用增大樣品量進(jìn)行蒸干濃縮的方式；(3)在衍生過(guò)程中減少加水量及衍生試劑的加入量；(4)將萃取過(guò)程正己烷的加入量減半，相當于增大濃縮倍數，經(jīng)回收試驗驗證符合要求。以3倍信噪比計算儀器的檢出限為2mg／L，經(jīng)換算，方法的檢出限為0.1mg／kg，與SN／T1948–2007液質(zhì)方法檢出限（0.10mg／kg）相吻合，證明該方法可以用于白酒中甜蜜素的檢測。
2.5 回收試驗
分別選取3種不同香型陰性白酒樣品，進(jìn)行加標回收試驗，測定結果及回收率計算結果見(jiàn)表2。由表2可知，不同香型白酒中甜蜜素回收率沒(méi)有明顯差別，在88%~96%之間。
2.6 比對試驗
為驗證該方法測定白酒中甜蜜素含量的準確性，選取6個(gè)陽(yáng)性白酒樣品，分別用氣相色譜法與液相色譜–質(zhì)譜法進(jìn)行比對試驗，結果見(jiàn)表3。由于液相色譜–質(zhì)譜法測定白酒中的甜蜜素是通過(guò)基質(zhì)匹配繪制標準曲線(xiàn)，排除了白酒基質(zhì)的干擾，濾膜過(guò)濾之后進(jìn)行測定，不存在較大的損失，測定結果準確度高；氣相色譜法測定的結果相對于液質(zhì)法略低，原因是由于氣相色譜法樣品前處理中衍生過(guò)程和萃取過(guò)程都比較復雜，會(huì )對測定結果造成一定的影響，但兩種方法測定結果的相對偏差為3.3%~8.3%，在誤差允許范圍之內。
3. 總結
山東譜析儀器建立了用毛細管色譜柱氣相色譜法測定白酒中甜蜜素含量的方法，在樣品前處理過(guò)程中通過(guò)增大樣品量、水浴蒸干濃縮、適當減少衍生試劑用量和最終溶劑萃取體積，增大了樣品濃縮倍數，大大降低了方法檢出限，方法的精密度、準確度和回收率均符合檢測要求。該方法與液質(zhì)連用法相比運行成本低，易于推廣。
